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ELISA試劑盒進行操作時以下幾點尤為重要!

日期:2021-06-27瀏覽:1487次

   ELISA試劑盒是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的試驗確診方法。Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。
  盡管ELISA試劑盒的操作過程看似簡單,但沒做到位的話就會影響試驗的作用。所以ELISA試劑盒在試驗過程中這幾點非常重要:
  1、重要的洗刷:
  不充分的洗刷會導(dǎo)致差異和高布景,從而帶來不抱負(fù)的試驗結(jié)果。假如未結(jié)合的材料殘留在微孔板中,那么它會添加布景噪音。有必要的話,可添加洗刷液中的鹽濃度,這會阻止非特異結(jié)合反響。假如布景過高,置疑洗刷不行時,能夠測驗添加洗刷次數(shù)。
  2、關(guān)鍵的關(guān)閉:
  關(guān)閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點。這就降低了可產(chǎn)生信號的抗體非特異結(jié)合的時機。假如布景過高,置疑關(guān)閉不充分,那么能夠測驗運用更高濃度的關(guān)閉液,或適當(dāng)延伸關(guān)閉時間。
  現(xiàn)在主要有兩種類型的關(guān)閉液:蛋白和非離子型去污劑。ELISA試劑盒運用的類型須取決于多個因素,包括微孔板的表面試劑、吸附的抗原、抗體和檢測試劑。好的關(guān)閉液應(yīng)降低非特異性結(jié)合,但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢測試劑發(fā)生相互作用。
  3、抗體濃度須優(yōu)化:
  假如試劑稍有不同,則或許需求優(yōu)化抗體的量。非特異的抗體結(jié)合會添加布景。為了防止這一點,切勿運用過多的一抗或二抗。
  4、檢測試劑要適量:
  切勿運用過多的檢測試劑。假如濃度過高,ELISA試劑盒或許未正確稀釋,則會導(dǎo)致高布景。也不要顯色過度,如有必要,優(yōu)化一下何時應(yīng)加入終止液。
  只要確保每一步操作都做到位,才會出現(xiàn)的試驗結(jié)果。所以ELISA試驗的每一步都很重要,不能夠漫不經(jīng)心。

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